三七為五加科多年生草本植物三七的干燥根和根莖,具有散 瘀止血,消腫定痛的功效,用于各種原因導致的出 血,淤血和跌打損傷。三七的主要活性成分是三七 總皂苷(panax notoginseng saponins,PNS),研究主 要以該類成分為參照物建立指紋圖譜。島津高效液相色譜儀(島津<蘇州>有 限公司),SK1200H 型超聲器(上??茖С晝x器有 限公司),DFY-300 搖擺式多功能高速中藥粉碎機 (溫州頂歷醫療器械有限公司),MSX(SD EE)型電 子天平(Sartorius,Goetiingen,Germanny),BL-600 型 電子天平(廈門佰倫斯電子科技有限公司)。
精密稱取三七藥材粉末(過 60 目篩)2.0 g,置于錐形瓶中,加入 70%乙醇 50 ml, 浸泡 30 min,80 ℃恒溫水浴加熱冷凝回流提取 1.5 h, 過濾,濾液濃縮至 2 ml 左右,與適量大孔樹脂(95% 乙醇浸泡至無氣泡)混合、拌勻,揮干。D-101 型大孔 樹脂柱色譜分離純化,用 95%乙醇大孔樹脂浸泡 3~ 4 h 至無氣泡,在色譜柱底部墊一小團棉花,裝大孔 樹脂層 10 cm 左右,純凈水洗至無醇味,壓平大孔樹 脂柱層面,加入樣品,放一團棉花。洗脫,先用 200 ml 純凈水洗脫,水洗脫液棄去,再用 60 ml 80%乙醇洗 脫,洗脫流速為 60 滴/min,乙醇洗脫液濃縮至干, 用 70%甲醇溶解,用 5 ml 容量瓶定容,混合均勻,通 過 0.45 μm 的微孔濾膜,即得。以往建立三七指紋圖譜的研究中,很少對三七 提取液經過分離純化后再建立指紋圖譜。本試驗參 考了三七有效成分分離純化的方法,選用 D-101 型 大孔樹脂對三七藥材提取液進行分離純化。