三萜類化合物(triterpenoids),又叫靈芝酸,是結 構多樣的有機化合物,具有多種生理功能。三萜的基 本骨架主要由 6 個異戊二烯單位組成,可形成 20 000 多種天然的三萜類化合物,以四環三萜和五環三萜兩 大類為主。TECAN model Infinite M200 酶標儀:瑞士帝肯公司;HH-S4 型恒溫水浴鍋:江蘇金怡儀器科技有限公 司;SK7200HP 型超聲波清洗器:上海科導超聲儀器有 限公司;Milli-Q 超純水儀:密理博中國有限公司;F160 型粉碎機:北京中興偉業儀器有限公司;CAP225D 型 (精度 0.1 mg)電子天平:德國賽多利斯集團。稱取 4 mg DPPH 固體試劑,甲醇溶解并定容至 100 mL,配制成 40 μg/mL 的 DPPH 溶液,避光保存備 用。精密稱取 5 mg VC 置于不同棕色容量瓶中,經甲醇 溶解并定容至 100 mL,稀釋配制成濃度為 29.00 μg/mL 的陽性對照溶液。
提取的三萜樣品對 DPPH 自由基的清除效果明 顯,在濃度 0.77 μg/mL 至 12.27 μg/mL 范圍內,隨著濃 度的增加其自由基清除率逐步遞增。與陽性對照 VC 相 比較,三萜樣品在較低濃度下時對 DPPH 自由基清除 能力低于 VC,而隨著三萜樣品濃度的增加,其清除能 力逐漸趨近于 VC。桃金娘葉三萜樣品和 VC 對 DPPH 自由基的 IC50 分別為 1.284 μg/mL 和 0.639 μg/mL。由單因素試驗確定了桃金娘葉三萜提取溶劑為 乙酸乙酯,并通過響應面試驗研究液料比、超聲功率、 超聲時間 3 個因素對三萜含量的影響。結果表明,在 試驗范圍內各因素對三萜含量的影響大小依次為超 聲功率>液料比>超聲時間,液料比和超聲功率對三萜 含量的影響較大。