材料與方法
稱取約 2 g 沉積物樣品,加入福爾馬林溶液 后于 4 ℃ 暗處保存。根據陳琛等的方法,將樣 品稀釋 10,000 倍后加入少量曲拉通,用 280 W 超聲儀(SK250H, 上??茖С晝x器有限公司) 進行 15 min 超聲浴。取 1 mL 處理后的樣品加 入 1 mL 20 μg/mL DAPI 染色劑于暗室染色 30 min 后過濾至 0.2 μm 聚碳酸酯膜(Whatman, 英國), 然后,在熒光顯微鏡(BX51, OLYMPUS)紫外光 下隨機選擇 10 個視野對藍色、清晰可見的細胞 進行計數(視野放大 400 倍)。對于 33 站位的柱狀沉積物樣品,各深度沉 積物間隙水中的硝酸鹽、亞硝酸鹽、銨鹽、磷酸 鹽和硅酸鹽濃度由 Quaatro 營養鹽自動分析儀 (Seal Analytical Ltd., 英國)測定;亞鐵離子和錳 離子濃度利用 ICP-AES( Perkin Elmer INC.,美 國)進行測定;硫酸鹽濃度使用 ICS-3000 離子色 譜(Diones, 美國)測定。
結果與討論
G6 站和 33 站分別獲得 23 cm 和 50 cm 柱狀 樣,根據細菌計數和熒光定量 PCR 檢測結果、拷 貝數和細胞數之間以及細胞數和生物量之間的 換算關系,可得到 G6 站和 33 站柱狀沉積物中總 細菌、AOB 和 DB 生物量隨深度的變化情況。33 站中 AOB 和 DB 占微生物總量的比例比 較穩定,而 G6 站中 AOB 和 DB 占總細菌生物量 的比例則在不同深度有很大范圍的波動, 說明劇烈混合為 AOB 和 DB 的生存提供了有利 條件,可以在沉積物的較深層次推動氨氧化和反 硝化作用,也就為河口區的硝化和反硝化作用提 供了更加有力的支持。
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