材料與方法
4 對 OSCC 及癌旁組織標本來源于南京醫科大 學附屬口腔醫院口腔頜面外科行口腔腫瘤根治性切 除 手 術 的 患 者,所有患者均簽署知情同 意 書。 BALB /c 裸鼠購自北京維通利華實驗動物技術有限 公司,人舌鱗癌細胞系 Cal27 購 自 美 國 ATCC。 HSF1、上皮細胞鈣粘蛋白( E-cadherin) 、α-SMA、成 纖維 細 胞 活 化 蛋 白 ( fibroblast activation protein, FAP) 和成纖維細胞特異蛋白-1 ( fibroblast-specific protein 1,FSP-1) 抗體均購自美國 Abcam 公司,波形 蛋白( Vimentin) 抗體購自上海碧云天生物技術有限 公司,β 肌動蛋白( β-actin) 抗體、辣根過氧化物酶標 記山羊抗鼠/兔二抗購自美國 Proteintech 公司,高純總 RNA 快速提取試劑盒購自北京百泰克生物技術有限公司。
結 果
經組織塊培養法以及差別酶消化法得到純化的 OSCC 和癌旁組織成纖維細胞。采用 Western blot 檢測了 α-SMA、FAP、FSP-1 等 CAFs 標記物和 HSF1 在兩類成纖維細胞中的表達,結果顯示: α-SMA 和 FAP 蛋白在 OSCC 成纖維細胞中呈現高表達,而在 癌旁成纖維細胞中基本不表達,FSP-1、HSF1 在OSCC 成纖維細胞中的蛋白表達豐度明顯高于癌旁 成纖維細胞。癌細胞因異質性以及遺傳特點的不穩定性易發 生突變而產生耐藥,造成療效不佳。而腫瘤微環境 是一個相對穩定的環境,異質性小,靶向腫瘤微環境 的治療策略具有很大的優勢。CAFs 是腫瘤微環 境中的一個重要組成部分,在與癌細胞“交叉對話” ( cross-talk) 促進腫瘤生長和侵襲方面發揮著關鍵作用。我們的研究揭示了 OSCC 的 CAFs 高表達 HSF1,提示 HSF1 可能在 OSCC 中發揮一定作用。
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