1 儀器與材料
配備 ESI 離子源的 HPLC1200-Q-TOF 6520MS ( 美國安捷倫) ; SK5200H 超聲波清洗儀( 上海科導超聲儀器有限公司) ; H-1600RW 高速冷凍離心機 ( 武漢世紀超杰實驗儀器有限公司) ; HX1002T 電子 天平( 武漢世紀超杰實驗儀器有限公司) ; Mill-Q 超純水系統( 美國 Millpore) 。
2 方法與結果
腸內容物樣品預處理: 低溫解凍腸內容物樣品 后,取3.5 g腸內容物樣品添加甲醇-鹽酸-水( 79.9 ∶ 0.1 ∶ 20) 10 ml 渦旋混勻,超聲( 60 W,40 kHz) 提取 10 min,4℃下離心( 14 000×g) 10 min。取出全部上清液 置于 EP 管中,隨后通過 C18固相萃取分離純化,先經 5 ml 甲醇和 5 ml 水活化,后加 5 ml 水淋洗,再用 2 ml 甲醇洗脫,收集洗脫液后經0.45 μm微孔濾膜濾過,室 溫下氮氣吹干,甲醇重溶進樣測定。
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