基于 GB 5009.121—2016 中的高效液 相色譜法的方法原理,優(yōu)化含蛋白質(zhì)樣品(以醬 油為研究對象)和不含蛋白質(zhì)樣品(以食醋為研 究對象)的 DHA 檢測前處理過程,包括提取溶 劑、蛋白沉淀劑、提取溫度和凈化方式的優(yōu)化, 獲得液相色譜法檢測 DHA 的最佳條件。此外, 對獲得的優(yōu)化后的檢測方法的檢出限、定量限、 線性范圍、精密度和正確度進行評價,以保證方 法的準確性和適用性,為食品中 DHA 含量日常 監(jiān)督檢測提供科學(xué)依據(jù)。Agilent 1260 液相色譜儀(配紫外檢測器), 湖南恒諾 3-18R 低溫高速離心機,Sartorius BT 224S 電子天平,Mettler Toledo XPR10 電子天平, 上海科導(dǎo)超聲 SK7200HP 超聲波清洗機,Mettler Toledo FE20 pH 計,上海那艾 NAI-FXCQY-12 固相萃取儀。
食品中 DHA 的提取一般在常溫下進行,而 溫度影響著提取的效率和回收率,為了確定樣品 中 DHA 最佳的提取溫度,本研究以 DHA 添加水 平為 25 mg/kg 的食醋和醬油為研究對象,采用不 同溫度下超聲提取,考察提取溫度對 DHA 回收 率的影響。通過對 DHA 檢測方法的前處 理條件,包括提取溶劑、蛋白沉淀劑、提取溫 度、凈化方法等參數(shù)進行優(yōu)化,建立了一種快 速、準確的液相色譜測定食醋和醬油中 DHA 含 量的方法。當以水為提取溶劑,硫酸鋅和亞鐵氰 化鉀(v/v=1∶1)聯(lián)合使用作為蛋白沉淀劑,在 30 ~ 50 ℃超聲提取 20 min,食醋和醬油中 DHA 的回收率和 RSD 最好,回收率和 RSD 分別為 98% ~ 102% 和 0.2% ~ 5%。